童年的一起突发事件，令彼得·帕克（安德鲁·加菲尔德 Andrew Garfield 饰）和父母生离死别。转眼彼得成为一名高中生，他偶然发现父亲的公文包，并从叔父本（马丁·辛 Martin Sheen 饰）处得到线索，于是启程前往奥斯库公司拜访父亲当年的合作伙伴——科特·康纳斯博士（瑞斯·伊凡斯 Rhys Ifans 饰）。在公司内四处寻找线索的彼得意外被蜘蛛咬了一口，回程途中他的身体发生奇异的变化。在康纳斯博士德引导下，彼得不断了解并发掘体内着超乎寻常的能力，喜怒哀乐，各种意想不到的事情迅速向他袭来。直到某日，他便成了影响深远的超级战士蜘蛛侠。 而城市内也出现了凶恶的蜥蜴人，彼得不平凡的人生就此展开……

故事紧接着上一部继续发展。延科（查宁·塔图姆 饰）和施密特（乔纳·希尔 饰）好不容易从高中“顺利毕业”，等待着他们的却是又一轮卧底行动，不过这一次，他们要挑战的对象是“大学”。和高中相比，大学里人际关系的复杂程度和课业难度都要更上一层楼，这一次，兄弟两人能够顺利完成任务吗？ 　　在学园中，延科加入了校足球队，结识了一帮志同道合的好友，与此同时，施密特选择就读艺术系，与古灵精怪的玛雅（安珀·史蒂芬斯 饰）发生了一段浪漫轶事。然而，丰富精彩的大学生活令密不可分的延科和施密特之间产生了裂痕，这裂痕之巨大很可能导致患难与共的两人最终分道扬镳。